J Clin Invest：揭示USP9X去乙酰基化ALDH1A3并维持GCSs的间充质特性

外膜母线粒体瘤（GBM）是最常见和破坏病态的人脑恶病态，其外观上在于广泛的内异质病态。尽管最近在多模式治疗方面取得了困难重重，但GBM高血压的结果即便如此令人沮丧。GBM拥有一个线粒体亚群，被称作GBM干线粒体（GSCs），有着自我备份活病态和多向分立潜能以及起始并能。因此，迫切需要探索针对GSC的取而代之治疗战略。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族包含19种酶，它们将内源和外源醛代谢成相应的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，投身于人体线粒体的各种生理全过程。越来越多的确凿证据指出，ALDH1A3在结核病干线粒体（CSCs）之前观感出极低活病态，并影响这些线粒体内的各种生物学外观上。在GBM之前，已推断出ALDH1A3作为持续之间充质（MES）GSC的自我备份和致瘤病态的决定性水分子。然而，MES GSCs之前ALDH1A3失调的选择病态即便如此是谜样的。2019年4月8日，南京医科大学第一医科王慧博开发团队等人在The Journal of Clinical Investigation上发表篇名“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文之前，推断出USP9X是一种显然的DUB，可适度ALDH1A3多谷胱甘肽化和稳定化。并且，USP9X是预见ALDH1A3hi MES GSCs富集的决定性水分子，是MES GSCs自我备份和致瘤病态所需的。同时还评估了USP9X抑止对高血压是从的MES GSC异种移植数学方法的潜在治果。为了确定ALDH1A3线粒体内究竟被谷胱甘肽 - 线粒体内酶体系统（UPS）翻译后掌控，科学研究职员首先运用于放线菌酮（CHX）阻绝线粒体内质从头合成并HEK293T线粒体和一个人六角形外膜线粒体（NHAs）之前的ALDH1A3线粒体内质程度。实际上，ALDH1A3在CHX检视的8足足内日益水解并完全扫描至少。此外，用线粒体内酶体抑止剂MG-132检视线粒体引致ALDH1A3线粒体内程度引人注意减低。这些数据指出ALDH1A3通过UPS水解。接下来，科学研究职员寻求认定负责ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并运用于靶向HEK293T线粒体之前的98DUB的siGENOMERTF文库完成RNAi筛选。该科学研究初始筛选认定了与ALDH1A3表述特别的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293线粒体之前的ALDH1A3共表述时，推断出只有USP9X能够与内源病态ALDH1A3这样一来相互作用，从而也许USP9X是掌控ALDH1A3稳定病态的引人注意候选物。为了测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或催化反应失活的基因突变C1566A USP9X（在催化反应结构域的一个决定性半胱氨酸之前携带点突变）转染到HEK293T线粒体之前。 WT USP9X而非C1566A基因突变的表述以剂量依赖病态方式减低ALDH1A3线粒体内程度，指出USP9X以依赖于其DUB活病态的方式适度ALDH1A3。外膜母线粒体瘤（GBM）干线粒体（GSC）的之间充质（MES）甲型代表癌线粒体亚群，其因其极低度洪水泛滥病态和对常规疗法的抗病态而闻名。最近已明确指出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为持续GSC的MES外观上的决定性这样一来影响。然而，支持异常ALDH1A3表述的选择病态即便如此难以捉摸。在该科学研究之前，科学研究职员推断出谷胱甘肽特异病态线粒体内酶9X（USP9X）是MES GSC之前ALDH1A3的显然去谷胱甘肽化酶。 USP9X与ALDH1A3相互作用，聚合并稳定化。此外，科学研究结果辨识FACS分选的USP9Xhi线粒体富集有着极低ALDH1A3活病态和有效性致瘤并能的MES GSC。USP9X的消耗掉引人注意下调ALDH1A3，引致MES GSC的自我备份和致瘤并能的丧失，这可以通过ALDH1A3的异位表述得到不大程度的补救。此外，科学研究职员还显然USP9X抑止剂WP1130诱导ALDH1A3水解并且在MES GSC衍生的原处异种移植数学方法之前辨识出引人注意的治疗功效。另外，USP9X与继发病态人GBM样品之前的ALDH1A3表述反感特别，并且对于有着MES亚组的高血压有着结节病价值。总的来说，科学研究结果揭示了USP9X作为ALDH1A3线粒体内稳定化的决定性去谷胱甘肽化酶和GSC定向治疗的潜在各种因素。原始引自：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019